基因修饰类型
基因敲除、基因敲入、基因过表达这三大类基因修饰模型又可以进一步细分,帮助我们应对各种研究需要。
各种基因修饰类型的汇总和比较见下表
目的 | 具体分类 | 特征 | 技术选择 | |
基因敲除 | Knockout, KO | 基因敲除 | 全身性的基因片段直接敲除 | ESC 打靶, CRISPR/Cas9 技术 |
Conditional knockout, CKO | 条件性基因敲除 | 与Cre鼠交配后,能实现特异组织或者全身性敲除 | ESC 打靶, CRISPR/Cas9 技术 | |
KO-first | 多用途条件基因敲除 | 与 Cre工具鼠交配可得表达报告基因以及基因敲除鼠;与 Flp 工具鼠交配可得到常规的Flox鼠 | ESC 打靶, CRISPR/Cas9 技术 | |
基因敲入 | Constitutive mutation | 点突变 | 全身性的基因突变 | ESC 打靶, CRISPR/Cas9 技术 |
Conditional mutation | 条件性点突变 | 与Cre鼠交配后,能实现特异 组织或者全身性的基因突变 | ESC 打靶, CRISPR/Cas9 技术 | |
Knockin | 敲入同时敲除 | 敲入基因表达,内源性基因不表达 | ESC 打靶, CRISPR/Cas9 技术 | |
Co-expression | 共表达 | 敲入基因和内源性基因同时表达 | ESC 打靶, CRISPR/Cas9 技术 | |
Humanization | 人源化 | 将动物基因部分或全部换成人源基因 | ESC 打靶, CRISPR/Cas9 技术 | |
基因过表达 | Random transgenesis | 随机插入转基因 | 外源基因随机整合到动物基因组 | 受精卵雄原核 DNA 注射或者慢病毒感染受精卵 |
PiggyBAC transgenesis | 转座子介导转基因 | 外源基因整合到动物基因组的转座酶识别位点 | Piggybac 转基因技术 | |
Site-specific knockin | 定点过表达 | 外源基因精确整合到 Rosa26/H11 基因内 | ESC 打靶, CRISPR/Cas9 技术 |
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